ICS 65. 020 B 16 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T18086—2000 植物检疫 烟霜霉病菌检疫鉴定方法 Plant quarantineMethods for inspection and identification of Peronospora hyoscyami de Bary f. sp. tabacina (Adam) Skalichy 2000-04-26发布 2000-10-01实施 国家质量技术监督局 发布 中华 人民共 #和国 国家标准 植物检疫 烟霜霉病菌检疫鉴定方法 GB/T18086—2000 * 中国标准出版社出版发行 北京西城区复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 http://www.bzcbs.com 电话：63787337、63787447 2000年9月第一版 反，2004年11月电子版制作 * 书号：155066·1-16951 版权专有 侵权必究 举报电话：（010）68533533 GB/T18086—2000 前 言 烟霜霉病是我国进境植物检疫危险性病害，为了防止该病菌随寄主传人我国，在进境检疫时，需正 确掌握烟霜霉病菌的检疫鉴定方法。 本标准在制定过程中，经过调查研究，分析有关资料和总结多年的实践经验，以及根据烟霜霉病菌 的生物学特性、病理学原理，确定各项技术指标。 本标准给出烟霜霉病病原菌的孢囊梗和孢囊及卵孢子的形态特征，两者可同时或单独作为烟霜霉 病菌的鉴定依据。 本标准的附录A是提示的附录，附录中的“冰冻匀浆法”是检验烟霜霉病菌卵孢子的一种较先进的 方法，但目前在国内尚未普及，故在检验烟霜霉病菌时，若条件允许，也可采用此法检验该病原产生的卵 孢子。 本标准由农业部提出。 本标准负责起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局， 本标准主要起草人：李怡珍、章正、钟国强、张传飞。 中华人民共和国国家标准 植物检疫 GB/T18086—2000 烟霜霉病菌检疫鉴定方法 Plant quarantineMethods for inspection and identification of Peronospora hyoscyami deBaryf. sp.tabacina(Adam)Skalichy 1范围 本标准规定了进境植物检疫中对烟霜霉病菌的检疫鉴定方法。 本标准适用于进境干烟叶和烟属植物种子、种苗的烟霜霉病菌检疫和鉴定 2原理 烟霜霉病菌为专性寄生菌，烟叶被侵染为害后，出现边缘模糊、褪绿的近圆形斑点，后期形成淡褐色 可脱落的坏死病斑。在适宜温湿度条件下，叶背面病斑长出淡蓝色霉状物，即烟霜霉病菌的孢囊梗和孢 囊；在一一定条件下，病组织内可形成卵孢子。病原菌的寄生专化性及其形态学特征是鉴定烟霜霉病菌的 依据。 3仪器、试剂 3.1手持扩大镜。 3.2带光源的扩大镜。 3.3双目解剖镜（10×～50X×）。 3.4显微镜（100X1000X）。 3.5离心机（1000r/min～4000r/min）。 3.6不锈钢筛（孔径60μm）。 3.7振荡器（200r/min）。 3.80.02mol/L磷酸缓冲液（pH=7)。 3.9苯胺蓝。 3.10乳酚油 乳酚油配制：苯酚结晶（水浴加热溶化）20mL、乳酸20mL、甘油40mL、蒸馏水20mL混合而成 3.1110%氢氧化钾溶液 氢氧化钾溶液配制：取氢氧化钾10g，加水90mL溶解配成10%氢氧化钾溶液。 4抽样 4.2用随机方法在货柜车、船舱、仓库堆位的上、中、下各层开件抽查，检查包内烟叶是否有可疑疫情， 随机在包内的各个部位取样，注意抽取等级差、叶色暗淡无光泽的烟叶带回室内检验 4.3抽查件数 国家质量技术监督局2000-04-26批准 2000-10-01实施 1