ICS65.150 B 50 中华人民共和国国家标准 GB/T18654.12—2008 代替GB/T18654.12—2002 养殖鱼类种质检验 第12部分：染色体组型分析 Inspection of germplasm for cultured fishes- Part 12: Method for the karyotype analysis 2008-07-31发布 2008-11-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T18654.12—2008 前言 GB/T18654《养殖鱼类种质检验》分为下列部分： 第1部分：检验规则； 第2部分：抽样方法； 第3部分：性状测定； 第4部分：年龄与生长的测定； 第5部分：食性分析； 第6部分：繁殖性能的测定； 第7部分：生态特性分析； 第8部分：耗氧率与临界室息点的测定； 第9部分：含肉率测定； 第10部分：肌肉营养成分的测定； 第11部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定； 第12部分：染色体组型分析； 第13部分：同工酶电泳分析； 第14部分：DNA含量的测定； 第15部分：RAPD分析； 本部分为GB/T18654的第12部分。 本部分代替GB/T18654.12—2002《养殖鱼类种质检验 第12部分：染色体组型分析》。 本部分与GB/T18654.12—2002相比主要变化如下： 增加了数码照相等先进技术； 一对7.2.9中的低渗时间进行了调整修订；对5.4中碳酸氢钠（NaHCO,）的浓度做了补充说明； 备予以补充完善； 对第3章至第8章中的部分实验描述修改准确，对部分文字描述予以更正； 对附录A.3.4和A.3.5中部分文字描述予以修订,增加B.2.1数码显微照相内容。 本部分的附录A和附录B为资料性附录。 本部分由中华人民共和国农业部提出。 本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。 本部分起草单位：中国水产科学研究院长江水产研究所。 本部分主要起草人：方耀林、周瑞琼、邹世平。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T18654.12—2002。 5Z1G GB/T18654.12—2008 养殖鱼类种质检验 第12部分：染色体组型分析 1范围 GB/T18654的本部分规定了鱼类染色体组型分析的原理、试剂和材料、仪器和设备、玻片标本的 制备和组型分析。 本部分适用于养殖鱼类染色体组型分析，对于自然种群鱼类及其他水生动物亦可参照执行。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T18654的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分：抽样方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于GB/T18654的本部分。 3. 1 体细胞体外培养法 somatic cell culture invitro 通过无菌操作，获取鱼的肾脏组织细胞或血细胞，在体外培养过程中，加人细胞分裂刺激物，刺激淋 巴细胞大量进入分裂状态。然后，加入适当浓度的秋水仙素，使细胞分裂被阻抑在分裂中期，而获得鱼 类细胞染色体中期分裂相。 3.2 体细胞体内培养法somaticcellcultureinvivo 通过向鱼体内注射细胞分裂刺激物，刺激淋巴细胞大量进人分裂状态。取出头肾组织在生理盐水 中将其充分撕碎，再加人适当浓度的秋水仙素。 3.3 体细胞直接法directmethodofsomaticcells 将小鱼浸泡在适当浓度的秋水仙素溶液中，使其分裂旺盛的鳃丝上皮细胞被阻抑在分裂中期，而获 得鱼类细胞染色体中期分裂相 3. 4 胚胎细胞直接法directmethodofembryocells 胞阻抑在分裂中期，获得鱼类细胞染色体中期分裂相。 3.5 空气干燥法air-dryingtechnique 将收集的细胞经过低渗、固定、滴片，然后斜放静置，待其自然干燥。 3.6 火焰干燥法flame-dryingtechnique 将收集的细胞经过低渗、固定、滴片，然后立即将玻片置于酒精灯的火焰上均匀烘烤（以玻片上刚出 1