ICS 67. 040 C 53 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 222462008 保健食品中泛酸钙的测定 Determination of calcium pantothenate in health foods 2008-11-01实施 2008-07-31发布 中华人民共和国卫生部 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T22246—2008 前言 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准负责起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。 本标准参加起草单位：河北省疾病预防控制中心 本标准主要起草人：杨大进、方从容、马兰、王竹天、秦振顺。 本标准为首次发布。 GB/T22246—2008 保健食品中泛酸钙的测定 1范围 本标准规定了营养素补充剂类保健食品中泛酸钙的测定方法。 本标准适用于营养素补充剂类保健食品中泛酸钙的测定。 本标准检出限：当取样量1.0g，定容至25mL，进样量10μL时，检出限（LOD）为2× 10-*g/100g，定量限（L0Q）为6×10-g/100g。 本标准的线性范围：2.5μg/mL～80μg/mL。 2原理 的泛酸钙用水在超声波振荡下提取，定容，离心后取上清液过滤膜，经C18反相柱分离，在紫外检测器 200nm波长处检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量 3试剂和材料 3.1乙腈(CH,CN)：色谱纯。 3.2磷酸（H,PO4）：分析纯。 3.3磷酸二氢钾（KH,PO）：分析纯。 3.40.02mol/L磷酸二氢钾溶液：取磷酸二氢钾2.722g，加水溶解成1000mL，用磷酸调节pH 至3.0。 3.5水（H,O）：为实验室一级用水，电导率（25℃）为0.01mS/m 3. 6 泛酸钙标准储备液：称量泛酸钙标准品约0.1g（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，加水 溶解并定容至刻度，混匀（4℃冰箱中保存备用，该溶液可保存5d）。 3.7泛酸钙标准使用液：准确量取1.0mL标准储备液（3.6）置于10mL容量瓶中，加水稀释至刻度， 混匀（4℃冰箱中保存备用，该溶液可保存5d）。 4仪器和设备 4.1高效液相色谱仪：附紫外检测器。 4.2超声波清洗器。 4.3离心机：4000r/min。 5分析步骤 5.1试样制备 5.1.1固体片剂或胶囊试样：称取0.1g～1.0g粉碎后的均匀试样（精确到0.001g），使试样浓度位 于标准曲线中。试样置于25mL容量瓶中，加水20mL，超声提取20min后，加水至刻度，摇匀，离心后 将上清液过0.45μm滤膜，滤液待进样 5.1.2液体试样：除碳酸饮料需超声除去二氧化碳后再取样外，其余液体试样均可直接准确量取适量 样液，使试样浓度位于标准曲线中。试样置于25mL容量瓶中，加水稀释至刻度后混匀，过0.45μm 滤膜，滤液备用。 1 GB/T22246—2008 5.2标准曲线的制备 吸取0.25、0.50、1.0、2.0、4.0、8.0mL泛酸钙标准使用液（相当于2.5μg、5.0μg、10μg、20μg、40 ug、80μg泛酸钙），分别置于10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。在给定的仪器条件下，进行色谱 分析，以峰高或峰面积对浓度作标准曲线。 5.3液相色谱参考条件 5.3.1色谱柱：ODSCis柱，250mmX4.6mm,5μm。 5.3.2柱温：30℃。 5.3.3紫外检测器：检测波长200nm。 5.3.4流动相：0.02mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调pH=3.0）十乙腈=95+5。 5.3.5流速:1.0mL/min。 5.3.6进样量：10L。 5.3.7色谱分析：取标准溶液系列及试样溶液注人色谱中，以保留时间定性，以试样峰面积或峰高与标 准比较定量。 6计算 试样中泛酸的含量按式（1)进行计算： c X V X 100 X= .(1) mX1000X1000 式中： X—试样中泛酸的含量，单位为克每百克或克每百毫升（g/100g或g/100mL）； c由标准曲线求得进样液中泛酸的浓度，单位为微克每毫升（μug/mL）； V——试样定容体积，单位为毫升（mL)； m一试样的质量或体积，单位为克或毫升（g或mL）。 结果由泛酸换算为泛酸钙的计算见式（2）： Xi =XX476.54/(219.23X2) (2) 式中： X一一试样中泛酸钙的含量，单位为克每百克或克每百毫升（g/100g或g/100mL）： X一试样中泛酸的含量，单位为克每百克或克每百毫升（g/100g或g/100mL）； 219.23、476.54—— 一分别为泛酸和泛酸钙的分子质量。 计算结果保留三位有效数字。 7精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。 8色谱图 泛酸钙标准色谱图和试样色谱图分别见图1~图2，泛酸钙紫外光谱图见图3。 2 GB/T 22246—2008 泛酸钙 00"0 吸 度 n - (00 * 2. ( 4. 00 00'9 8. 00 10.00 12. 00 14. 00 16.00 18. 00 thnin 图1 泛酸钙标准色谱图 0. 015 泛酸钙 吸 0. 005 0.000 2.00 4. 00 6.00 8. 0m 10. 00 12. 00 14. 00 16.00 18. 0.0 t'min 图 2 泛酸钙试样色谱图 ~93.6 收 0. 01 - 光度 (0. 02- 72, 1 136.3 183 0. 00 2D0. 00 250. 00 300. 00 400. 00 350. 00 图3 泛酸钙紫外光谱图