ICS 67. 040 C 53 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 22252—2008 保健食品中辅酶Q10的测定 Determination of coenzyme Qio in health foods 2008-11-01实施 2008-07-31发布 中华人民共和国卫生部 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T22252—2008 前言 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准负责起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。 本标准参加起草单位：北京市疾病预防控制中心 本标准主要起草人：王竹天、鲁杰、杨大进、蒋定国、罗仁才。 本标准为首次发布。 GB/T22252—2008 保健食品中辅酶Q10的测定 1范围 本标准规定了保健食品中辅酶Q10的测定方法。 当信噪比S/N=3，取样量5.0g，定容至25mL，进样量10μL时，检出限（LOD）为1.6× 10-*g/100g；当信噪比S/N=10，取样量5.0g，定容至25mL，进样量10μL时，定量限（LOQ）为 5.0×10-4g/100g。线性范围为5.0μg/mL~100μg/mL。 2原理 根据辅酶Q1o不溶于水，易溶于石油醚、苯、乙醇等有机溶剂的特性，采用正已烷提取试样中辅酶 Q10，无水乙醇稀释，过滤后进高效液相色谱仪，经反相Cl8色谱柱分离后，由紫外检测器检测，根据保留 时间和峰面积进行定性和定量。 3试剂和材料 3.1无水乙醇（CH，OH)：优级纯。 3.2四氢呋喃（CH,O)：分析纯。 3.3乙腈（CHCN)：色谱纯。 3.4正已烷（CH.）：分析纯 3.5水（H,O)：为实验室一级用水，电导率（25℃）为0.01mS/m。 3.6辅酶Q1o标准品：纯度≥99.5%。 3.7辅酶Q1a标准储备液（2.00mg/mL）：准确称取辅酶Q1e标准品0.1g（精确到0.0001g），置于 50mL棕色容量瓶中，加正已烷溶解并定容至刻度，混匀（此标准储备液在避光条件下于4℃冰箱中，可 保存3d)。 3.8辅酶Ql标准使用液（200μg/mL）：准确吸取1.00mL辅酶Q1o标准储备溶液于10mL棕色容量 瓶中，用无水乙醇定容至刻度（此标准使用液在避光条件下于4℃冰箱中，可保存3d）。 4仪器和设备 4.1高效液相色谱仪：附紫外检测器。 4.2超声波清洗器。 5分析步骤 5.1试样的处理 根据试样含量，称取1g～5g均匀试样（精确至0.001g），置于25mL棕色容量瓶中，加正已烷 20mL，超声提取20min后，加正已烷至刻度，摇匀，量取1.0mL上述溶液于10mL棕色容量瓶中，用 无水乙醇稀释至刻度，混匀，过0.45um滤膜，滤液备用。 5.2标准曲线的制备 分别吸取标准使用液（3.8），用正已烷-无水乙醇（1十9）的混合溶剂稀释并在棕色容量瓶中定容的 浓度分别为4.0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、50μg/mL标准系列。 1 GB/T22252—2008 5.3液相色谱参考条件 5.3.1色谱柱：ODS Cis柱,150mmX4.6mm,5μm。 5.3.2柱温：25℃。 5.3.3 紫外检测器：检测波长280nm。 5.3. 4 ：流动相：乙腈-四氢呋喃-水（55十40十5）。 5.3.5 流速：1.0mL/min。 5.3.6 进样体积：10μL。 5.3.7 色谱分析：取标准溶液及试样溶液注人色谱中，以保留时间定性，以试样峰面积或峰高与标准比 较定量。 5.4注意事项 操作过程中应注意避免阳光直射。 6 计算 试样中辅酶Q1o的含量按式（1）进行计算： cXVxfX100 X=. ..(1) mX1000X1000 式中： X一一试样中辅酶Qio的含量，单位为克每百克（g/100g）； 从标准曲线查得的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； C 一试样定容体积，单位为毫升（mL）； f——样液稀释倍数； 一试样的质量，单位为克（g)。 m 计算结果保留两位有效数字。 7 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 8色谱图 在上述色谱条件下的色谱图见图1～图2。 度0.090 0. 080 020'0 0. 060 0. 050 0. 040 0. 030 0. 020 0. 010 0. 000 00'21 00°9T00'91 00'FT. 00 61. 00'zT 00'11 00 '000'6. 00'8, 00 2, 00 9, 00 'S,00 ' 00'8. 00 '3, 00 T s/min1 图1辅酶Q标准色谱图 2 GB/T22252—2008 吸 光度 1.40 1.20 辅酶Q10 1.00 0.80 0.60 0. 40 661 12. 0.20 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.0014.0015.0016.0017.0018.0019.00 20.00 21.00 (/iir 图 2 2辅酶Q试样色谱图