ICS 67.180. 10 X 31 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T18932.10—2002 蜂蜜中溴螨酯、4,4'-二溴二苯甲酮 残留量的测定方法 气相色谱/质谱法 Method for the determination of bromopropylate and 4,4'-dibromobenzophenone residues in honey Gas chromatography/mass spectrometry 2003-06-01实施 2002-12-30发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 GB/T18932.10—2002 前 言 GB/T18932的本部分遵循GB/T20001.4—2001《标准编写规则 第4部分：化学分析方法》的编 写规则。 本部分的附录A、附录B、附录C为资料性附录。 本部分由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。 本部分由中华全国供销合作总社归口。 本部分起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。 本部分主要起草人：庞国芳、刘永明、林忠。 本部分系首次发布的国家标准。 1 GB/T18932.10—2002 蜂蜜中溴螨酯、4,4-二溴二苯甲酮 残留量的测定方法气相色谱/质谱法 1范围 GB/T18932的本部分规定了蜂蜜中溴螨酯、4，4'-二溴二苯甲酮残留量气相色谱/质谱测定及质谱 确证方法 本部分适用于蜂蜜中溴螨酯、4，4'-二溴二苯甲酮残留量的测定。 本部分的方法检出限：溴螨酯为0.012mg/kg；4，4-二溴二苯甲酮为0.040mg/kg。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T6379一1986测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性 (neq ISO 5725:1981) GB/T6682—1992分析实验室用水规格和试验方法（neqISO3696：1987） 3原理 试样中残留的溴螨酯和4,4'-二溴二苯甲酮用甲醇十水提取，经过OasisHLB固相萃取柱或相当 者萃取净化后，用气相色谱/质谱仪选择离子检测方式直接测定，外标法定量。必要时，用多离子检测方 式确证。 4试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682一1992规定的一级水。 4.1甲醇：一级色谱纯。 4.2正已烷：重蒸馏。 4.3甲醇十水（8+7)：将80mL的甲醇与70mL的水混合。 4.4OasisHLB固相萃取柱或相当者：3mL，60mg。使用前，用3mL甲醇活化和3mL水平衡萃 取柱。 4.5标准物质：溴螨酯纯度≥98.5%；4，4-二溴二苯甲酮纯度≥97%。 4.6标准溶液：分别准确称取适量的溴螨酯、4，4-二溴二苯甲酮标准物质（4.5），用正已烷溶解配成浓 度为0.1mg/mL的标准储备溶液。根据需要用正已烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。 5仪器 5.1气相色谱/质谱联用仪。 5.2液体混匀器。 GB/T18932.10—2002 5.3旋转蒸发器。 5.4真空泵。 5.5固相萃取真空装置。 5.6玻璃储液器：50mL。 5.7微量注射器：10μL。 6试样的制备与保存 6.1试样的制备 对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀；对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴 中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。分出0.5kg作为试样。制备好的试样置于样 品瓶中，密封，并标明标记。 6.2试样的保存 将试样于常温下保存。 7分析步骤 7.1提取 称取5g试样，精确至0.01g，置于150mL三角瓶中。加入15mL甲醇+水（4.3），在液体混匀器 上快速混合1min，使试样完全溶解。 7.2净化 将上接玻璃储液器（5.6）的OaSisHLB固相萃取柱（4.4）安装在固相萃取真空装置（5.5）上，把混 合均匀的样液倒人玻璃储液器，在减压情况下，调节样液以约2mL/min速度通过固相萃取柱，待样液 完全流出后，用10mL甲醇十水分三次洗涤三角瓶，并过柱。弃去全部流出液，萃取柱在65kPa负压下 减压抽干15min，用10mL正已烷洗脱萃取柱，洗脱液收集于鸡心瓶中。在旋转蒸发器上浓缩至干，用 正已烷定容1mL，摇匀。此溶液供气相色谱/质谱仪测定。 7.3测定 7.3.1气相色谱/质谱测定条件 a） 色谱柱：DB-5MS（30m×0.25mm×0.10um）石英毛细管柱或相当者； b) 色谱柱温度：50℃保持0.5min，然后以20℃/min程序升温至280℃，保持5min； c) 载气：氮气，纯度≥99.999%，流速：1.4mL/min； d) 进样口温度：290℃； e) 进样量：1μL； f) 进样方式：无分流进样，1min后开阀； g) 电子轰击源（EI)：70eV； h) 离子源温度：250℃； i GC-MS接口温度：280℃C； j) 电子倍增电压：自动调谐： k） 选择离子检测：m/z341，m/z340；辅助离子：m/z183，m/z261。 7.3.2气相色谱/质谱测定 根据样液中杀螨剂浓度，选定峰面积相近的标准工作液。标准工作液和样液中杀螨剂的响应值均 应在仪器检测的线性范围内。标准工作液与样液等体积参插进样测定。溴螨酯选择m/z341，4，4-二 漠二苯甲酮选择m/z340作为定量离子进行定量测定。根据峰面积计算样品中漠螨酯、4，4-二漠二苯 甲酮的实际含量。在上述色谱/质谱条件下，4，4-二溴二苯甲酮的保留时间约为8.8min，溴螨酯的保 留时间约为10.2min。 2 GB/T18932.10—2002 标准物质的选择离子检测色谱图参见附录A中图A.1。 本方法的添加回收率数据参见附录C。 7.4确证 7.4.1色谱/质谱确证条件 确证的测定条件除检测方式外，其他条件同7.3.1。 检测方式：多离子检测。 7.4.2色谱/质谱确证 谱图，根据质谱图，得到所选择的离子之间丰度之比值。溴螨酯的丰度比约为100：12：48：10；4，4°- 二溴二苯甲酮的丰度比约为10：57：100：22。在对样液和标准工作液按7.3.1条件进行测定时，如 果样液和标准工作液在相同保留时间有检测离子峰出现，则用多离子检测方式进行检测，得出被测物中 离子之间丰度之比值，并与标准溶液相对照来确证。标准物质的扫描质谱图参见附录B中图B.1、 图 B. 2 。 7.5平行试验 按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。 7.6空白试验 除不称取试样外，均按上述分析步骤进行。 8结果计算 结果按式(1)计算： AC.V X= .......(1) A.·m 式中： X-—试样中杀螨剂残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A——样品溶液中杀螨剂的峰面积； C—标准工作溶液中杀螨剂的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)； V- 样品溶液定容体积，单位为毫升（mL）； A 标准溶液中杀螨剂的峰面积； m 样品溶液所代表的试样量，单位为克（g）。 注：计算结果应扣除空白值、 9精密度 GB/T18932的本部分精密度数据是按照GB/T6379一1986的规定，通过八个实验室对四个添加 水平的试样所做的试验中确定的。获得重复性和再现性的值是以95%的可信度来计算。 9.1重复性 在重复性条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限（r），溴螨酯和4，4'-二溴二 苯甲酮的含量范围及重复性方程见表1。 表1含量范围及重复性和再现性方程 单位为毫克每千克 名称 含量范围 重复性限” 再现性限R 溴螨酯 0.012~0.12 lgr=0. 804 2 lgm-1. 534 0 R=0.091 1m+0.001 5 4.4'-二溴二苯甲酮 0.040~0.40 r=0.0581m-0.0004 IgR=0.5412lgm-1.4097 注：m为两次测定值的平均值， 3