UDC 628.19 : 543.06 z 16 GB 中华人民共和国国家标准 GB 11895—89 水质 苯并（a)芪的测定 乙酰化滤纸层析荧光分光光度法 Water qualityDetermination of benzo(a)- pyreneAcetylated paper chromatography with fluorescence spectrophotometric method 1989-12-25发布 1990-07-01实施 国家技术监督局 发布 中华人民共和国国家标准 水质苯并(a)芪的测定 GB 11895.89 乙酰化滤纸层析荧光分光光度法 Water quality--Determination of benzo(a)- with fluorescence spectrophotometric method 1主题内容与适用范围 本方法规定了测定水质中苯并(a)芘(以下简称B(a)P)的方法。 本标准适用于饮用水、地面水、生活污水、工业废水。最低检出浓度为0.004μB/L。 注意B(a)P是一种由五个环构成的多环芳烃，它是多环芳烃类的强致癌代表物。基于B(a)P的强 致癌性，按本标准方法分析时必须戴抗有机溶剂的手套，操作应在白糖瓷盘中进行（如溶液转移、定容、 点样等）。室内应避免阳光直接照射，通风良好。 2原理 水中多环芳烃及环已烷可溶物经环已烷萃取（水样必须充分摇勺），萃取液用无水硫酸钠脱水、浓 缩，而后经乙酰化滤纸分离。分离后的B(a)P用荧光分光光度计测定。 3试剂 除另有说明外，分析时均使用分析纯试剂和蒸馏水。 3. 1B(a)P标准溶液的配制:称取 5. 00 mg 商体标准 B(a)P于 50 mL容量瓶中[因 B(a)P是强致癌物, 为了减少污染，以少转移为好]，用少量苯溶解后，加环已烷至标线，其浓度为100/mL。将此贮备液用 环己烷稀释成10 μ8/mL的标推使用液，避光贮于冰箱中。 3.2乙酰化滤纸的制备：把15×30cm的层析滤纸15至20张卷成高15cm的圆简状，逐张放入 1000 mL高型烧杯中，杯壁与靠杯的第一张纸间插入一根玻璃棒，杯中间放一枚玻璃熔封的电磁搅拌铁 芯，在通风柜中,沿杯壁慢慢倒入乙酰化剂（由苯+乙酸酐一浓硫酸一750mL十250mL十0.5mL混合配 制成），磁力恒温搅拌器的温度保持55士1℃，连续反应6h。取出乙酰化滤纸，用自来水漂洗3~4次，再 用蒸馏水漂洗2～3次,晾干。次日用尤水乙醇浸泡4 h后,取出乙酰化滤纸，晾干压平,备用。 3.3环已烷，重蒸。用荧光分光光度计检查：在荧光激发波长367nm，狭缝10nm；荧光发射狭缝2nm， 波长405nm应无峰出现。 3. 4丙酮,重蒸。 3.5 甲醇。 3.7苯,重蒸。 3.8 乙酸酐。 3. 9 硫酸 0 =1. 84 g/mL。 国家环境保护局1989-12-25批准 1990 0701实施 1 GB11895—89 3.10无水硫酸钠。 3.11二甲基亚砜（DMS0）：用前先用环已烷萃取两次（500mL二甲基亚加50mL环已烷萃取）弃去 环已烷后备用。 4仪器 常用实验室设备和下列仪器。 4.1备有紫外激发和荧光分光的荧光分光光度计，光程为10mm的石英比色ⅢL。 4.2紫外分析仪（带365nm或254nm的滤光片）。 4. 3 康氏振荡器。 4.4磁力恒温搅拌器 4.5立式离心机，转速为4000r/min。 4.6 分液漏斗，1L、3I,100mL。活塞上禁用油性润滑剂，活塞直接用水或有机溶剂润滑即可。 4.7 锥形瓶,250 mL。具磨口玻璃塞。 4.8恒温水浴锅。 4.9层析缸， 4.10真磨口塞刻度离心管，5mL。 4. 11点样用玻璃毛细管(白制)。 4. 12分析天平,感量 0. 01 mg。 5样品保存 水样应贮于玻璃瓶中并避光，当日（21h内)用环已烷萃取，环已烷萃取液放入冰箱中保存。 避年 9 6.1样品和标样的预处理 6.1.1清洁水和地面水萃取 康氏振荡器上每次振荡3min,取下放气，静置半小时，待分层后，将两次环己烧萃取液收集于具塞锥形 瓶中，弃去水相部分。 6.1.2工业废水的萃取 取混勾的工业废水样1000mL，放入1000mL分液漏斗中，每次用50mL环已烷萃取两次，在康氏 振荡器上每次振荡3min，敢下放气，静置半小时，待分层后，将两次环已烷萃取液收集于具塞锥形瓶中， 弃去水相部分。 6.1.3脱水,浓缩 在（上述)环已烷萃取液中加入无水硫酸钠约20~50g），静置至完全脱水（约1～2h）,至具塞锥形 瓶底部无水为止。如果环已烷萃取液颜色比较深，则将脱水后环已烷定容至100mL，分取其一定体积浓 缩；如果颜色不深则全部浓缩。在温度为70～75℃用KD浓缩器减压浓缩至近干，用苯洗涤浓缩管三 次，每次用 3滴,再浓缩至 0.05 mL,以备纸层析用。 6.1.4纸层析分离 在乙酰化滤纸30cm长的下端3cm处，用铅笔画一横线，横线两端各留出1.5cm，以2.4cm的间 隔将标准 B(a)P与样品浓缩液用玻璃毛细管交叉点样。点样斑点直径不超过 3~4 mm。点样过程中用 冷风吹下。每支浓缩管洗两次，每次用-滴苯，全部点在纸上。将点过样的层析滤纸挂在层析缸内架子 上，加入展开剂【甲醇十乙醚一蒸馏水一4十4十1(体积比)),直到滤纸下端浸入展开剂1cm为止。加盖， 用透明胶纸密封。于暗室中展开2～4 h。取出层析滤纸,在紫外分析仪照射下用铅笔圈出标样B(a)P斑 2 GB11895—89 点以及样品中与其高度（R值）相同的紫蓝色斑点范围。 剪下用铅笔圜出的斑点,剪成小条，分别放人 5mL具寒离心管中。在105～110℃烘箱中烘 10 min （亦可在干燥器中或干净空气中晾干）。在干燥器内冷却后，加入丙酮至标线。用手振荡1nrin后，以 3000 t/min的速度离心2min。上清液留待测量用。 6.2测定 将标推B(a)P斑点和样品斑点的丙酮洗脱液分别注入10 mm 的石英比色中,在激发、发射狭缝 分别为10 nm、2 nm,激发波长为 367 nm 处,测其发射波长 402 nm.405 nm、408 nm处的荧光强度 , 7 结果的表示 用窄基线法按下列公式计算出标准B(a)P和样品 B(a)P的相对荧光强度,再计算出 B(a)P的含量 （（用相对比较计算法）。 相对荧光强度 F = Fa05r 2 M×F ×R 0 F标准 X V 式中 C一-永样B(a)P含量,ug/L; -标准 B(a)P点样量,ug; -标准B(a)P的相对荧光强度; F标准 F¥磊-样品斑点的相对荧光强度； 一水样体积,L： R - -环已烷提取液总体积与浓缩时所取的环已烷提取液的体积之比值。 8精密度与准确度 8.1精密度 五个实验室自行配制的含有B(a)P近似 0. 2 1g/L的焦化废水的精密度见表1。 表 1 精密度 实验室编号 cV.% 1 0. 230 6. 9 2 0. 199 8. 0 3 0.213 13. 0 4 0.202 6. 6 5 0. 179 4. 2 8. 2准确度 两种工业废水的加标回收率见表2、表3。 表2焦化废水加标回收结果 实验室编号 cV,% 107. 0 6.9 2 93.3 8.0 3 GB 11895—89 续表2 实验室编号 n CV,% 3 121. 0 13. 0 4 99. 0 6. 6 5 73.3 4. 2 表 3 沥青废水加标回收结果 实验室编号 CV,% 1 79.8 4.4 2 83. 0 12 3 81. 4 7. 6 93.3 6. 2 4 SZIC