ICS 67.060 C 53 中华人民共和国国家标准 GB/T 37493—2019 粮油检验 谷物、豆类中可溶性糖的测定 铜还原-碘量法 Inspection of grain and oils-Determination of soluble sugar in cereals and pules seeds-Shaffer-Somogyi 2019-05-10发布 2019-12-01实施 国家市场监督管理总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 37493—2019 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家粮食和物资储备局提出 本标准由全国粮油标准化技术委员会（SAC/TC270）归口。 本标准起草单位：农业农村部谷物及制品质量监督检验测试中心（哈尔滨）。 本标准主要起草人：苏萍、杜英秋、单宏、王乐凯、杨焕春、程爱华。 SaC 05 GB/T37493—2019 粮油检验 谷物、豆类中可溶性糖的测定 铜还原-碘量法 1范围 本标准规定了谷物、豆类中可溶性糖的铜还原-碘量测定方法的原理、试剂、仪器与设备、试样制备、 试样测定、结果计算及精密度。 本标准适用于谷物、豆类中可溶性糖的测定。 本标准方法的定量测定线性范围为0mg2.5mg还原糖。 2规范性引用文件 2 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T5490 粮油检验 一般规则 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3原理 谷物、豆类中的可溶性糖被水解成还原糖后与碱性铜试剂中的Cu2+作用，生成氧化亚铜（Cu2O）沉 淀。在硫酸的酸性条件下，氧化亚铜能定量地消耗碘酸钾和碘化钾生成的碘，溶液中剩余的碘用硫代硫 酸钠标准溶液滴定，同时以水代替样液做空白滴定，将空白与样液的滴定差值代人，由滴定标准系列糖 液的线性方程计算出样品中可溶性糖的含量。 4试剂 除非另有规定，本方法中所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。 无水碳酸钠（Na2CO：）。 4.2 酒石酸钾钠(KNaC,H,O。·4H,O)。 4.3 硫酸铜(CuSO4·5H,O)。 4.4 碳酸氢钠（NaHCO）。 4.5 碘化钾(KI)。 4.6 碘酸钾（KIO）。 4.7 无水乙醇(C,H,OH)。 4.8 草酸钾(K,C,O,·H,O)。 4.9 硫酸（H,SO4)。 4.10 硫酸锌(ZnSO,·7H,O)。 4.11 亚铁氰化钾（[K,Fe(CN)」·3H,O)。 4.12 盐酸(HCI)。 1 GB/T37493—2019 4.13 氢氧化钠（NaOH）。 4.14 硫代硫酸钠（NazS,O3·5H,O)。 4.15 葡萄糖（CH12O）。 4.16 可溶性淀粉。 4.17 甲基红（C15HisON）。 4.18 硫酸铜溶液（100g/L）：称取10g硫酸铜（4.3）溶于水，定容至100mL 4.19 碱性铜试剂：称取25.0g无水碳酸钠（4.1）和25.0g酒石酸钾钠（4.2）于1000mL烧杯中，加 500mL水使其溶解。通过漏斗在液面以下加入75mL硫酸铜溶液（4.18）。然后加入20.0g碳酸氢钠 （4.4），使其完全溶解后再加人5.0g碘化钾（4.5），最后移入1000mL容量瓶中。准确称取0.8917g碘 酸钾（4.6）（经105℃干燥2h），用水溶解，并转入上述容量瓶中，用水定容，过滤后备用，过夜。 4.20乙醇溶液（4+1）：量取800mL无水乙醇（4.7)加水稀释至1000mL 4.21 效期 7 d。 4.22 硫酸溶液（1mol/L）：量取56mL硫酸（4.9）缓慢加人800mL水中，稀释至1000mL。 4.23 硫酸锌溶液（300g/L）：称取30g硫酸锌（4.10）溶于水，定容至100mL。 4.24 亚铁氰化钾溶液（150g/L）：称取15g亚铁氰化钾（4.11）溶于水，定容至100mL。 4.25 盐酸溶液（1+1）：量取500mL盐酸（4.12），加水稀释至1000mL。 4.26 氢氧化钠溶液（1mol/L）：称取40.00g氢氧化钠（4.13）于250mL烧杯中，溶解后定容至 1 000 mL。 4.27硫代硫酸钠标准溶液（0.1mol/L)：称取26.00g硫代硫酸钠（4.14）和0.2g无水碳酸钠（4.1)溶于 1000mL水中，缓缓煮沸10min，冷却后，用煮沸并冷却的水定容至1000mL。贮于棕色瓶，存放在低 温暗处，按GB/T601标定后使用。 4.28硫代硫酸钠标准工作溶液（0.005mol/L）：由硫代硫酸钠标准溶液（4.27）准确稀释而成。现用现 配，有效期24h。 4.29葡萄糖标准溶液：准确称取0.1250g经过96℃士2℃干燥2h的葡萄糖（4.15）溶于水，定容至 250mL。此溶液每毫升相当于0.5mg葡萄糖。 4.30淀粉指示剂：称取1.0g可溶性淀粉（4.16）于烧杯中，滴人少量冷水调成糊状，加人100mL煮沸 的水，再继续煮沸，冷却即可，盛于滴瓶中，置冰箱中保存。 4.31甲基红指示剂（1g/L）：称取甲基红（4.17)0.1g用无水乙醇（4.7）溶解后，定容至100mL。 5仪器与设备 5.1分析天平：感量0.1mg。 5.2实验磨。 5.3电热水浴锅。 5.4碱式滴定管：25mL。 5.5容量瓶：100mL。 5.6具塞刻度试管：50mL。 6分析步骤 6.1试样制备 分取不少于20g混合均匀的试验样品，用实验磨（5.2）粉碎，使90%样品通过孔径0.425mm （40目）的试验筛，合并筛上、筛下物，充分混合，室温保存备用。 2 GB/T37493—2019 6.2试样处理 （4.20）定容，过滤。取滤液50mL于100mL蒸发皿中，置60℃~70℃水浴上蒸发除去乙醇，至2mL~ 3mL时，加人硫酸锌溶液（4.23）、亚铁氰化钾溶液（4.24）各1mL，摇匀，然后用水洗人50mL容量瓶 中，定容、过滤。取滤液25mL于50mL容量瓶中，加盐酸溶液（4.25）2.5mL，80℃水浴中水解 10min，冷却后加甲基红指示剂（4.31)两滴，用氢氧化钠溶液（4.26）中和至中性，用水定容至刻度。 6.3标准曲线的绘制 准确吸取1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL葡萄糖标准溶液（4.29）（相当于0.5mg、 1.0mg、1.5mg、2.0mg、2.5mg葡萄糖）于50mL具塞刻度试管（5.6）中，加水补齐至5.00mL。加人 5.0mL碱性铜试剂（4.19），置于沸水浴中加热15min。取出后立即置于冷水中冷却5min，沿管壁加入 2mL碘化钾-草酸钾溶液（4.21），再加入3mL硫酸溶液（4.22），立即摇动，使氧化铜完全溶解（未加酸 之前请勿摇动）。用硫代硫酸钠标准工作溶液（4.28）滴定至浅黄绿色时，加入6滴淀粉指示剂（4.30）， 继续滴定至蓝色消失为终点。同时以水代替葡萄糖标准溶液做空白。 以系列标准葡萄糖的质量（mg）为横坐标，以空白试验与标准葡萄糖液滴定差值为纵坐标，绘制标 准曲线。 6.4试样的测定 根据不同样品中可溶性糖的含量，吸取6.2试样处理液1.00mL5.00mL，加水补齐至5.00mL。 以下按自6.3“加人5.0mL碱性铜试剂（4.19）....”起依法操作，同时以水代替样液做空白。空白与试 样滴定差值代人标准曲线即可求得样液中糖的含量，从而计算样品中可溶性糖的含量 7结果计算 试样中可溶性糖的含量按式（1）计算。 A (1) 式中： X——试样中可溶性糖的含量（以干基结果表示），单位为克每百克（g/100g）； A一一将空白与试样滴定差值代人标准曲线求得样液中葡萄糖的质量，单位为毫克（mg)； 试样质量，单位为克（g)； m V一测定时吸取的样液体积，单位为毫升（mL）； H—试样水分含量，单位为克每百克（g/100g）。 取两次测定结果的平均值，计算结果保留到小数点后两位。 测定结果不符合重复性要求时，应按GB/T5490的规定重新测定，计算结果。 8精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。