ICS 65.120 B 46 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 17778—2005 代替GB/T17778—1999 预混合饲料中d-生物素的测定 Determination of d-biotin in premix 2005-09-05发布 2006-02-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 5212 中华人民共 和 国 国家标准 预混合饲料中d-生物素的测定 GB/T17778—2005 * 中国标准出版社出版发行 北京西城区复兴门外三里河北街16号 邮政编码：100045 http://www.spc.net.cn 电话：63787337、63787447 2006年2月第一版 2006年2月电子版制作 * 书号：155066：1-26934 版权专有 侵权必究 举报电话：（010)68533533 GB/T 17778—2005 前言 本标准是GB/T17778—1999《预混料中d-生物素的测定》的修订版 本标准与前版相比主要技术内容变化如下： 补充了“高效液相色谱法”，并规定其为仲裁法 在“分光光度法”中“试样溶液的提取”增加了用水先溶解的步骤；在“测定”中用“吸光度的一阶 导数的峰差值”代替原“吸光度”。 本标准自实施之日起，代替GB/T17778 3—1999 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位：国家饲料质量监督检验中心（武汉）。 本标准主要起草人：钱防、屈利文、杨林、杨先奎。 1 GB/T 17778—2005 预混合饲料中d-生物素的测定 1范围 本标准规定了用分光光度仪和高效液相色谱仪测定预混合饲料中d-生物素含量的两种方法。 本标准规定的方法1和方法2适用于d-生物素含量大于1.0mg/kg的复合预混合饲料、维生素预 混合饲料的测定。提取液的浓度范围为2.0μg/mL~20.0μg/mL。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（neqISO3696：1987） GB/T14699.1饲料采样 3方法1——分光光度法 3.1原理 用乙醇水溶液将试样中d-生物素提取出来，在硫酸乙醇溶液中d-生物素和4-二甲氨基肉桂醛生成 橙色化合物，在一定范围内颜色深浅与d-生物素含量成正比。 3.2试剂和材料 除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。水符合GB/T6682三级水的规定。 3.2.1无水乙醇。 3.2.2乙醇溶液：将90体积的乙醇与10体积的水混匀。 3.2.3硫酸-乙醇溶液：将2体积的硫酸与98体积的无水乙醇混匀。 3.2.44-二甲氨基肉桂醛无水乙醇溶液:2g/L。 3.2.5d-生物素标准溶液 3.2.5.1标准储备液：准确称取0.1000gd-生物素标准品溶解于乙醇溶液（3.2.2）中，定量转入 100mL容量瓶中，用乙醇水溶液稀释至刻度，混匀。此液1.00mL含d-生物素1.00mg。 3.2.5.2标准工作液：准确移取d-生物素标准储备溶液（3.2.5.1)1.00mL于50mL容量瓶中，加乙 醇溶液稀释至刻度，混匀。此液1.00mL含d-生物素20.0μg。 3.3仪器与设备 3.3.1分光光度计（有一阶导数功能）。 3.3.2实验室用超声波提取器。 3.3.3分析天平：感量0.0001g 3.4试样的制备 按GB/T14699.1规定方法采样，选取饲料样品至少500g，四分法缩减至100g，磨碎，通过 0.42mm孔筛，混匀，装入密闭容器中，保存备用。 3.5分析步骤 3.5.1试样溶液的提取 称取维生素预混料约2g（精确至0.0001g）、复合预混料约5g~10g（精确至0.0001g），置于磨 口平底烧瓶中，加人5.00mL水置超声波提取器（3.3.2）中超声20min后，再加人20mL无水乙醇