ICS 65.100 B 13 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 31270.17—2014 化学农药环境安全评价试验准则 第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验 Test guidelines on environmental safety assessment for chemical pesticides- Part 17:Trichogramma acute toxicity test 2014-10-10发布 2015-03-11实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T31270.17—2014 前言 GB/T31270《化学农药环境安全评价试验准则》分为21个部分： 第1部分：土壤降解试验； 第2部分：水解试验； 第3部分：光解试验； 第4部分：土壤吸附/解吸试验； 第5部分：土壤淋溶试验； 第6部分：挥发性试验； 一第7部分：生物富集试验； 第8部分：水-沉积物系统降解试验； 第9部分：鸟类急性毒性试验； 第10部分：蜜蜂急性毒性试验； 第11部分：家蚕急性毒性试验； 第12部分：鱼类急性毒性试验； 第13部分：涵类急性活动抑制试验； 一第14部分：藻类生长抑制试验； 第15部分：蜥蚓急性毒性试验； 第16部分：土壤微生物毒性试验； 第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验； 第18部分：天敌两栖类急性毒性试验； 第19部分：非靶标植物影响试验； 第20部分：家畜短期饲喂毒性试验； 第21部分：大型甲壳类生物毒性试验。 本部分是GB/T31270的第17部分。 本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。 本部分负责起草单位：农业部农药检定所、环保部南京环境科学研究所。 本部分主要起草人：林荣华、陈红英、王红、韩志华、张燕宁、余向阳、薛明、吴若涵。 I GB/T 31270.17—2014 化学农药环境安全评价试验准则 第17部分：天敌赤眼蜂急性毒性试验 1范围 GB/T31270的本部分规定了化学农药对赤眼蜂成蜂急性毒性试验的材料、条件、操作、质量控制、 数据处理、试验报告等的基本要求。 本部分适用于为化学农药登记而进行的赤眼蜂成蜂急性毒性试验，其他类型的农药可参照使用。 本部分不适用于易挥发和难溶解的化学农药 2术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 半致死用量 medianlethal rate 在急性毒性试验中，引起50%供试生物死亡时的供试物使用量，用LR50表示。 注：单位为mga.i./cm，即单位面积上所附着的供试物有效成分的量。 2.2 安全系数 safety factor 赤眼蜂的半致死用量LR5与供试农药的田间推荐施用浓度的比值，可用式（1)表示： 药物对赤眼蜂的LRso（mga.i./cm²） 安全系数= ......(1) 该药物的田间推荐施用浓度（mga.i./cm²） 2.3 供试物test substance 试验中需要测试的物质。 2.4 化学农药 chemical pesticide 利用化学物质人工合成的农药。其中有些以天然产品中的活性物质为母体，进行仿制、结构改造， 创新而成，为仿生合成农药。 同义词：有机合成农药syntheticorganicpesticide。 ［NY/T1667.1—2008,定义2.3.1] 2.5 原药 5technical material 在制造过程中得到的有效成分及杂质组成的最终产品，不能含有可见的外来物质和任何添加物，必 要时可加入少量的稳定剂。 [NY/T1667.2—2008,定义2.5.1] 2.6 制剂formulationproduct 由农药原药（或母药）和助剂制成使用状态稳定的产品。 [NY/T1667.2—2008.定义2.4] 1 GB/T 31270.17—2014 2.7 有效成分 active ingredient;a.i. 农药产品中具有生物活性的特定化学结构成分。 [NY/T1667.2—2008,定义3.1] 3试验概述 将供试物用丙酮等溶剂配制成系列不同浓度的稀释液，定量加入指形管中滚吸成药膜管，然后将试 验用赤眼蜂放入其中爬行1h后转入无药指形管，24h后调查管中的死亡和存活蜂数。求出农药对赤 眼蜂的LR50值和95%置信限。 4试验方法 4.1 材料和条件 4.1.1 供试生物 选择松毛虫赤眼蜂（Trichogrammadendrolimi）、玉米赤眼蜂（Trichogrammaostriniae）、稻 赤眼蜂（Trichogramma japonicum）、广赤眼蜂（Trichogrammaevanescens）、拟澳洲赤眼蜂（Tri- chogramma confusum）或舟蛾赤眼蜂（Trichogrammaclosterae）等的其中一种进行试验。 4.1.2供试寄主生物 蚕（Antheraea pernyi）卵或米蛾（Corcyra cephalonica）卵。 4.1.3供试物 农药制剂、原药或纯品。制剂用蒸馏水溶解，原药或纯品用丙酮等溶剂溶解。 4.1.4主要仪器设备 主要仪器设备如下： 指形管； 一人工气候箱； 一移液器； 一容量瓶等。 4.1.5试验条件 试验应在温度25℃土2℃、相对湿度70%~80%、避光条件下进行。 4.2 试验操作 4.2.1试验用成蜂的预培养 SZC 将被寄生的寄主卵置于温度25℃土2℃、相对湿度50%～80%，避光条件下培养，羽化出的成蜂用 于急性毒性试验。试验成蜂应来源于同一时间、同一批次的寄生卵。大量出蜂一般在开始羽化后的 24h左右，试验应使用开始羽化后48h内羽化的成蜂。 2 GB/T 31270.17—2014 4.2.2预试验 按正式试验的条件，以较大的间距设置4个～5个浓度组，求出试验用赤眼蜂最高全存活剂量与最 低全致死剂量，以确定正式试验的用药剂量范围。 4.2.3正式试验 根据预试验结果，正式试验按等比关系设置至少5个梯度浓度（几何级差应控制在2.2倍以内），并 设空白对照组，用溶剂溶解的还需设溶剂对照组，对照组和每个处理组均设3个重复，每个重复100头士 10头赤眼蜂。在指形管中加人定量的供试药液，将药液在指形管中充分滚吸直至晾干制成药膜管，然 后将供试赤眼蜂放人药膜管中爬行1h后转入无药指形管中，饲喂10%蜂蜜水，并封紧管口。对照组的 成蜂数量与处理组相同，对照组与处理组应同时进行。在转人无药指形管中24h后检查并记录管中死 亡和存活蜂数。 4.2.4限度试验 设置上限剂量为供试物田间施用量的10倍。若试验用赤眼蜂在供试物达到上限用量时未出现死 亡，则无需继续试验；若供试物溶解度小于田间施用量的10倍时，则采用其最大溶解度作为上限浓度。 4.3数据处理 SAG 4.3.1统计分析方法的选择 LR5o的计算可采用直线内插法、概率单位图解法或机率值法估算，也可应用有关毒性数据计算软 件进行分析和计算。 4.3.2寇氏法 用寇氏法可求出赤眼蜂在24h的LR，值及95%置信限。LR5的计算见式（2）： logLR5o=Xm-i(ZP-0.5) .(2) 式中： Xm—最高浓度的对数； 一相邻浓度比值的对数； ZP一一各组死亡率的总和（以小数表示）。 95%置信限的计算见式（3）： 95%置信限=logLR50±1.96SlogLR50 ·(3) 标准误的计算见式（4）： pq SlogLRsa= :(4) 式中： p——1个组的死亡率； 一各浓度组赤眼蜂的数量。 4.3.3直线内插法 采用线性刻度坐标，绘制死亡百分率对试验物质浓度的曲线，求出50%死亡时的LR50值。 3