ICS 85.010 CCS Y 30 中华人民共和国国家标准 GB/T42702—2023 纸、纸板和纸制品 抗菌性能的测定 Paper,board and paper products-Determination of antibacterial activity 2023-05-23发布 2023-12-01实施 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T 42702—2023 前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任 本文件由中国轻工业联合会提出。 本文件由全国造纸工业标准化技术委员会（SAC/TC141）归口。 本文件起草单位：中轻（晋江）卫生用品研究有限公司、中国制浆造纸研究院有限公司、中轻纸品检 验认证有限公司、福建恒安集团有限公司、珠海红塔仁恒包装股份有限公司、尤妮佳生活用品（中国）有 限公司、住友精化（中国）投资有限公司、金佰利（中国）有限公司、国家纸张质量检验检测中心。 本文件主要起草人：刘洋、孙文刚、李良军、刘俊杰、温建宇、吴晓彪、罗概、马洪生、卢诗强、杨静 王嘉俊、李春、洪雅文、陈彦娣、李丽娥、曾铮铮、毛萃、袁桃静、王鑫婷。 GB/T 42702—2023 纸、纸板和纸制品抗菌性能的测定 1范围 本文件描述了纸、纸板和纸制品抗菌（抑菌）性能的测定方法，包括载体抗菌试验、抑菌环试验、振荡 烧瓶试验、抑菌成分转移测定试验、高吸水材料抑菌性能试验和长效防霉性能试验。 本文件适用于纸、纸板和纸制品及其原材料 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 本文件。 WS/T650一2019抗菌和抑菌效果评价方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 抗菌antibacterial 采用化学或物理方法杀灭或妨碍细菌生长繁殖，可减少其数量以及活性的过程。 3.2 抑菌 南antibacterial 采用化学或物理方法抑制或妨碍细菌生长繁殖及其活性的过程。 4 测定方法和试验菌的选择 4.1测定方法的选择 4.1.1普通样品 根据样品性能及使用方式选择合适的测定方法。对于含有溶出性抗菌成分的样品，或纤维原料（含 有非溶出性抗菌成分）具有抗菌功能且吸水性较好的样品，可选择载体抗菌试验（第5章）进行定量测 定；对于含有溶出性抑菌成分的样品，如果进行定性测定，可选择抑菌环试验（第6章）；对于含有非溶出 性抗菌成分的样品，经鉴定试验确认后，可选择振荡烧瓶试验（第7章）进行定量测定。 样品吸水性判断方法：将样品裁成尺寸为2.0cm×3.0cm的试样（试样可叠放，但片数不得超过 3片），在试样表面滴加100L菌悬液，如果菌悬液能被试样完全吸收，则视为该样品为吸水性较好的 样品，例如抑菌生活用纸。 4.1.2特殊样品 根据其样品特性选择相应的测定方法：在鉴别食品接触用纸、纸板和纸制品中的抑菌成分是否发生 1 GB/T42702—2023 转移时，可选择抑菌成分转移测定试验（第8章）；对于高吸收性树脂及含高吸收性树脂的吸收芯体，可 选择高吸水材料抑菌性能试验（第9章）；对于具有长效防霉作用的纸、纸板和纸制品，可选择长效防霉 性能试验（第10章）。 4.2 2试验菌的选择 进行抗菌（抑菌）性能测定时，若无特殊说明，应使用方法中规定的细菌进行试验，若标明对真菌或 特定微生物有抗菌（抑菌）作用，则应使用方法中规定的真菌或特定微生物进行测定。 5 载体抗菌试验 5.1 适用范围 本方法适用于含有溶出性抗菌成分的纸、纸板和纸制品及其原材料，或纤维原料（含有非溶出性抗 菌成分）具有抗菌功能且吸水性较好的样品，进行定量抗菌性能测定。 注：若样品中仅部分纤维具有抗菌作用，且不含溶出性抗菌成分，采用此方法的检测结果可能偏低。 5.2 2试验材料 5.2.1培养基和试剂 5.2.1.1 一般要求 试验所用试剂应为分析纯或适合于微生物试验用。宜使用现有商业化的脱水原料制备培养基，并 严格按照相关产品制造商的使用说明操作。 5.2.1.2 2营养琼脂培养基 蛋白陈 10 g 氯化钠 5 g 牛肉膏 3 g 琼脂 15 g~20 g 蒸馏水 1000mL 5.2.1.3 3沙氏琼脂培养基 10 g 蛋白陈 葡萄糖 40 g 琼脂 20 g 蒸馏水 1 000 mL 5.2.1.4 4磷酸盐缓冲液（PBS) 2.83 g 磷酸氢二钠 磷酸二氢钾 1.36 g 蒸馏水 1000mL PBS灭菌后，pH为7.2~7.4,2℃~8℃保存备用。 5.2.2试验器具 5.2.2.1 Ⅱ级生物安全柜。 2 GB/T42702—2023 5.2.2.2恒温培养箱：温控精度士1℃。 5.2.2.3旋涡式振荡器。 5.2.2.4 高压蒸汽灭菌锅。 5.2.2.5试管、烧杯、锥形瓶、接种环、移液器等实验室常用器具。 5.2.3试验菌 5.2.3.1 细菌：大肠杆菌（8099或CICC10899）或大肠杆菌（ATCC25922），金黄色葡萄球菌（ATCC6538 或ATCC25923)。 5.2.3.2真菌：白色念珠菌（ATCC10231）。 5.2.3.3根据产品特定用途所需用的其他菌株。 5.3试样、对照样和菌悬液制备 5.3.1试样的制备 在无菌条件下打开样品包装，避开样品边缘，将样品剪成2.0cm×3.0cm的试样，每片试样应确保 试验过程中的菌悬液被完全吸收（滴加菌液后倾斜平血，无游离液体流出），如1片试样无法满足要 求，可适当增加试样的片数（不应超过3片）。若试样需进行灭菌处理，可采用高压灭菌法（121℃， 103kPa，15min），如果高压灭菌法不适用，可采用环氧乙烷、紫外线照射或其他合适的方法对试样进行 灭菌。若试样进行过灭菌处理，应在报告中注明灭菌方式。 5.3.2对照样的制备 可选用与待测样品同等材质、同等大小但未经抗菌处理的样品作为对照样，此时，试验中对照样的 层数应与试样相同；也可选用经验证对微生物生长不产生影响的对照样品（如不含抗菌成分，与试样同 步操作，作用相同时间，接种相同菌量，回收菌数与空白试验回收菌数的比值>90%的样品），将其裁剪 成与待测试样同等大小作为对照样。对照样应经高压消毒灭菌（121℃，103kPa，15min），如果高压灭 菌法不适用，可采用环氧乙烷或其他合适方法进行灭菌。报告中应注明对照样品的种类和灭菌方式。 5.3.3菌悬液的制备 取菌株第2代第5代的营养琼脂培养基（真菌为沙氏琼脂培养基）新鲜斜面培养物（18h～ 24h），用5.0mL的PBS洗下菌苔，使菌悬浮均匀后用PBS稀释至适宜浓度，试验时每份对照组回收菌 数应为1.0X10*CFU～5.0X104CFU。 5.4试验步骤 样片上均勾滴加100μL，每份对照组回收菌数应为1.0×10CFU～5.0×104CFU。开始计时，作用至 说明书规定的时间（最长不超过120min），用无菌镊子将试验样片和对照样片分别放入5mL的 PBS中，充分混匀，进行10倍系列稀释，选择适宜稀释度，吸取0.5mL接种平皿，每个稀释度接种2个 平血，将冷却至40℃～45℃的熔化营养琼脂培养基或沙氏琼脂培养基倾注于已加入样液的平血中，每 72h（真菌），进行活菌菌落计数。试验重复3次，分别计算抑菌率。 5.5计算公式 按公式（1）计算抑菌率： 3 GB/T42702—2023 N.-N. X 100 :(1) N. 式中： K ——抑菌率,%; N。一一对照样平均回收菌落数，单位为每份对照样菌落形成单位（CFU/份）； N一试样平均回收菌落数，单位为每份试样菌落形成单位（CFU/份）。 选择菌落数在20CFU～200CFU之间的平板计数菌落数，若所有稀释度的平板菌落数均小于 20CFU，则选用最低稀释倍数菌落数计算结果。 数均为0，或计算结果修约后为100.0%，则抑菌率记为>99.9%。 5.6结果表述 5.6.1各次抑菌率均≥50%，表明该样品相对于对照样具有抗菌作用。 5.6.2各次抑菌率均≥90%，表明该样品相对于对照样具有较强的抗菌作用。 5.7 注意事项 试验过程中，对于实际使用时间较短的产品（如抑菌生活用纸），作用时间不应超过5min；其他产 品应不超过120min。 6抑菌环试验 6.1适用范围 材料的抑菌性能定性测定；也可用于鉴别试样中是否含有溶出性抑菌成分。 6.2试验材料 6.2.1培养基和试剂 同5.2.1。 6.2.2试验器具 6.2.2.1 Ⅱ级生物安全柜。 6.2.2.2 恒温培养箱：温控精度士1℃。 6.2.2.3 旋涡式振荡器。 6.2.2.4 高压蒸汽灭菌锅。 6.2.2.5 游标卡尺。 6.2.2.6 试管、烧杯、锥形瓶、接种环、移液器等实验室常用器具。 6.2.3试验菌 同5.2.3。 6.3试样、阴性对照样和试验菌制备 6.3.1试样的制备 在无菌条件下打开样品包装，避开样品边缘，将其制成直径为5.0mm、厚度不超过4.0mm的圆片 4 GB/T42702—2023 （块），每4片（块）一组。若试样需进行灭菌处理，可采用高压灭菌法（121℃，103kPa，15min），如果高 压灭菌法不适用，可采用环氧乙烧、紫外线照射或其他合适方法对试样进行灭菌。若试样进行过灭菌处 理，应在报告中注明灭菌方式。 6.3.2阴性对照样的制备 可选用与待测样品同等材质、同等大小但未经抑菌处理的样品作为阴性对照样，此时，试验中对照 样的层数应与试样相同；也可选用经验证不含溶