ICS 11.080.01 C 47 GB 中华人民共和国国家标准 GB18281.5—2015/IS011138-5:2006 医疗保健产品灭菌 生物指示物 第5部分：低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物 Sterilization of health care products-Biological indicatorPart 5:Biological indicators for low-temperature steam and formaldehyde sterilization processes (ISO 11138-5:2006,IDT) 2015-12-10发布 2017-01-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB18281.5—2015/ISO11138-5:2006 目 次 前言 引言 范围 规范性引用文件 术语和定义 通用要求 5 试验菌 菌悬液 载体和内层包装 8 染菌载体和生物指示物 微生物数量和抗力 9 附录A（规范性附录） 测定低温蒸汽甲醛灭菌过程中抗力的方法 附录B（资料性附录） 低温蒸汽甲醛用生物指示物的液相测试方法原理 参考文献· GB18281.5—2015/ISO11138-5:2006 前言 GB18281的本部分的全部技术内容为强制性 GB18281《医疗保健产品灭菌生物指示物》分为以下五个部分： 第1部分：通则； 第2部分：环氧乙烷灭菌用生物指示物； 一第3部分：湿热灭菌用生物指示物； 一第4部分：干热灭菌用生物指示物； 一第5部分：低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物。 本部分是GB18281的第5部分。 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分使用翻译法等同采用ISO11138-5：2006《医疗保健产品的灭菌 生物指示物 厂第5部分：低 温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物》。 与本部分中规范性引用的国际文件有一致性对应关系的我国文件如下： GB18281.1一2015医疗保健品灭菌生物指示物 J第1部分：通则（ISO11138-1:2006， IDT)。 本部分做了下列编辑性修改： 按照GB/T1.1的要求进行了一些编辑上的修改； 删除国际标准的前言。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发行机构不承担识别这些专利的责任。 本部分由国家食品药品监督管理总局提出。 本部分由全国消毒技术与设备标准化技术委员会（SAC/TC200）归口。 本部分起草单位：国家食品药品监督管理局广州医疗器械质量监督检验中心、杭州泰林生物技术设 备有限公司、山东新华医疗器械股份有限公司。 本部分主要起草人：徐红蕾、夏信群、黄鸿新、朱晓明。 GB18281.5—2015/IS011138-5:2006 引言 GB18281规定了用于监测灭菌周期的生物指示物在生产、标签、测试方法和性能方面的通用要求 还包括运营商打算用于验证和监控灭菌过程的菌悬液。GB18281的本部分给出了具体的用于低温蒸 汽甲醛灭菌处理的生物指示物的要求 GB18281标准系列所提供的是一般要求和所需的测试方法。目前这个先进的标准系列是由专业 的制造商、使用者和监管部门参与制定的标准。其意图不仅仅是不提倡在不建议使用的方面使用生物 指标，而是提供现今为人所知的生产那些生物指示物通用的要求 标准中提供了用于验证和监控低温蒸汽甲醛灭菌过程的一般要求（见ISO14937）。 注意：一些国家或地区已经出版的标准可能涵盖灭菌或生物指示物的要求 对生物指示物结果的选用、使用和解释可见ISO14161。 IV GB18281.5—2015/1S011138-5:2006 医疗保健产品灭菌 生物指示物 第5部分：低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物 1范围 GB18281的本部分规定了广测试微生物、菌悬液、染菌载体、生物指示物和利用低温蒸汽甲醛为灭菌 剂来评估灭菌处理效果的生物指示物测试方法的通用要求。 注1：低温蒸汽甲醛灭菌过程的控制和确认的要求见ISO14937。 注2：关于工作场所的安全要求见国家或区域条例。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 ISO11138-1:2006医疗保健品灭菌生物指示物第1部分：通则（Sterilizationofhealthcare products—Biological indicatorsPartl:Genral requirements) 3术语和定义 ISO11138-1中界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 低温蒸汽甲醛灭菌low-temperaturesteamandformaldehydesterilization 通过动力排气，使预先包装的物品处于负压状态暴露于蒸汽，在低于100℃温度下，注人甲醛气体， 使得灭菌剂在维持时间保持稳态的工艺 4通用要求 ISO11138-1的要求适用于本部分。 5试验菌 5.1试验菌应是嗜热脂肪地芽孢杆菌或其他已被证明符合本部分要求的等效性能的微生物菌株。 注1：嗜热脂肪芽孢杆菌已重新分类为嗜热脂肪地芽孢杆菌。 注2：目前被认为适用的嗜热脂肪地芽孢杆菌，如NCIB8224、DSM6790、ATCC10149和ATCC12980。 5.2如使用嗜热脂肪地芽孢杆菌以外的一株试验菌，那么这株试验菌的抗力适宜性应待确定。 6菌悬液 ISO11138-1的要求适用于本部分。 1 GB18281.5—2015/IS011138-5:2006 7载体和内层包装 7.1用低温蒸汽甲醛为灭菌剂的生物指示物的载体和内层包装的材料应符合IS011138-1：2006中5.2 和ISO11138-1：2006中的附录B的要求。 注：由于纤维素表面对甲醛的化学吸附作用，滤纸类不适宜作载体。 7.2应遵守确定的暴露条件： a）1 最低暴露温度：不小于5℃（上述制造商声称的最高温度）； b）最高暴露温度：依照制造商声称的最大值；如果制造商未声明，最大暴露温度应不小于 100℃; c） 暴露时间：不小于60min。 注：这些条件已成为一种告戒，对带菌体的实际限制在低温蒸汽甲醛灭菌过程的应用范围内。条件的选择要能显 示出实际的低温蒸汽甲醛灭菌过程对载体的实际要求。 8染菌载体和生物指示物 ISO11138-1的要求适用于本部分。 9微生物数量和抗力 9.1制造商应根据ISO11138-1:2006中6.4的要求规定抗力特性。 物带菌体）。 9.3待接种的带菌体和生物带菌体的增殖量应不小于1.0×10°。 9.4抗力应表示为60℃时的D值，单位为分（min）。每一批/批次的生物指示物或者染菌载体的D 值应用60℃时的D值表示，保存至一位小数。 9.5当按照附录A进行测试时，培养基、染菌载体或生物指示物包括嗜热脂肪地芽孢杆菌的D6o值 应≥6min。其他微生物也应有D值以便应用。 9.6生物指示物的抗力也可以用FBI0值表示（见ISO11138-1：2006中3.7）。本部分和GB18281的其 他部分特指的抗力应按照标准规定的特定条件测试。 9.7应按照ISO11138-1:2006的附录C和附录D所给定的方法测定D值。 9.8D值的测定和存活-杀灭反应特性基于附录A中的过程参数 9.9存活-杀灭区间可用ISO11138-1：2006中附录E的公式来计算。 注：比较同一生产商的不同批号的产品信息对于使用者是有用的。 示例：套用ISO11138-1:2006中附录E的公式以及本部分给出的种群和最小D值，存活-杀灭反应特性值是： 60℃时：存活时间≥18min，杀灭时间≤54min。 2 GB18281.5—2015/1SO11138-5:2006 附录A （规范性附录） 测定低温蒸汽甲醛灭菌过程中抗力的方法 A.1通则 本方法是基于一种染菌载体浸人到甲醛水溶液的定性的测试。本方法的测试结果比使用气相腔式 方法的结果有更好的重现性。 A.3提供了测试方法的特别要求。 A.2 染菌载体的暴露条件 试系统应能在1min~150min（精确至土10s）时间段内保持特定的暴露条件。 A.2.2甲醛水溶液的浓度应用化学分析方法确定。 A.2.3该方法应被验证过。 A.3方法 A.3.1 将染菌载体完全浸入测试试管中已预热至60℃土0.5℃的1mol/L士0.01mol/L的甲醛水溶 液中。 A.3.2确认染菌载体完全浸入甲醛水溶液中而不是漂浮于表面。 A.3.3进行测试时使用防护技术以防止偶发污染。 A.3.4在设定的暴露时间终了，取出甲醛溶液中的染菌载体， A.3.5去除载体上的多余液体，将其将在室温下浸人装有过滤过的2%NazSO：溶液的试管10min，以 反应掉载体上残留的甲醛。盖上试管。要注意尽量不要搅动甲醛及中和剂溶液，以防止“冲走”测试微 生物。 注：组氨酸和半胱氨酸是有效的中和剂。 A.3.6特定的生长培养基应能保证覆盖测试微生物。 注：本测试中大豆酪蛋白消化酶适用。 A.3.7将载体转移至装有10mL生长介质（A.3.6）的试管中。盖上试管。 A.3.8 3将试管保持90℃60min以激发孢子的活性 A.3.9 最后，进行载体的培养（见ISO11138-1：2006中第7章）。 A.4测定抗力 抗力特性值应用ISO11138-1:2006的附录C、附录D和附录E给定的方法测定。 3