ICS65.020.01 B 16 中华人民共和国国家标准 GB/T 35874—2018 甘蔗黑穗病抗性鉴定技术规程 Technical regulation for evaluation of sugarcane resistance to smut (Sporisoriumscitaminea Syd.) 2018-09-01实施 2018-02-06发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T35874—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中国标准化研究院提出并归口。 本标准起草单位：广西壮族自治区农业科学院、广西壮族自治区标准技术研究院、中国标准化研究 院、中国农业科学院甘蔗研究中心。 本标准主要起草人：曾云清、王全永、周志权、唐其展、金健英、高轶静、罗超雁、韦善富、王欢、席兴军 杨锋、黄琨、林建业、林翠霞、彭英知、吴敏、方位宽、郭晨琳、初侨、何美玲、罗琨。 GB/T358742018 甘蔗黑穗病抗性鉴定技术规程 1范围 本标准规定了甘蔗黑穗病的抗性鉴定方法和抗病性评价标准。 本标准适用于甘蔗品种、品系及种质资源对甘蔗黑穗病抗性的鉴定及评价。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 甘蔗黑穗病 sugarcane smut disease 由甘蔗鞭黑粉菌（SporisoriumscitamineaSyd.）侵染引起的主要病害，其典型症状为在染病茎牛 长点出现黑色鞭状物。 2.2 SAC 对照品种 control variety 已知抗性的标准对照品种，把待测无性系的抗性表现与其相比较。 2.3 针刺浸渍接种法 pin-prickdippinginoculationmethod 用昆虫针刺伤蔗芽芽鳞，浸人黑穗病菌孢子悬浮液的接种方法。 3病原菌孢子悬浮液制备 3.1病原物收集和保存 黑穗病菌孢子的收集应于晴天在田间采集未散粉的不同甘蔗品种黑穗病黑色鞭状物，除去外层多 余附着物，将其装入干净牛皮纸袋折口密封。38℃烘干72h，过孔径0.250筛（60目筛）后用纸袋密封 置低温(0℃~4℃)保存备用。 3.2活力检测 将采集的孢子接种到培养基（1%琼脂十1%蔗糖）上，（28土1℃暗培养24h。60倍显微镜观察孢 3.3病原物孢子悬浮液配制 浮液待用。 4抗性鉴定 4 4.1抗性鉴定圃 鉴定圃应设在温室内或棚内。温度范围：15℃~50℃；湿度范围：30%~80%。 1 GB/T35874—2018 4.2 鉴定设计 每50个鉴定材料设置一组对照，随机区组重复3次。对照材料中包含已知抗性的标准对照品种： 桂糖37号（高抗）、NCo310（中感）、F134（感病）和F173（高感）。 4.3 种植要求 周转箱种植，每箱一个重复，种一个品种40个芽。塑料箱内尺寸规格为665mmX415mm×170mm。 4.4接种 4.4.1接种时间及材料准备 3月～5月之间，播种前24h进行。选取15条～20条生长正常的蔗，将每条蔗茎的中上部8个～ 10个芽，砍成150个单芽种茎，清水室温浸种24h后，（52土0.5）℃温汤浸种30min或（50土0.5）℃温汤 4.4.2接种方法 用针在芽鳞表面的四周刺4针～6针，刺入深度2mm～3mm，浸人孢子悬浮液中10min，在暗培 养箱中（28土1)℃保湿催芽24h。 4.4.3接种后管理 周转箱装肥力中等偏上的细土至10cm高，摆种后盖土5cm，淋水至土壤湿透，盖膜。出苗揭膜 后，保持土壤湿润。甘蔗进人5叶期应合理施肥 病情调查与分级 C 5.1调查时间 揭膜时调查出苗，出现第一条黑穗病鞭状物时记载开始发病时间和发病株数（包括主苗、分苗和 主茎、分薬茎）。 5.2 调查方法 第一次调查记载后每周调查一次，同时拔出发病种茎，直至发病终止，累计发病株数，按式（1)计算 发病率。 ×100% .(1) 式中： I——发病率; P发病株数； Z——调查总株数。 5.3 病情分级 病情分级对应描述见表1。 2 SZIG GB/T35874—2018 表1 甘蔗抗黑穗病鉴定病情级别划分 病情级别 描述 1 发病率≤3 2 发病率>3,≤6 3 发病率>6,≤9 4 发病率>9,≤12 5 发病率>12,≤25 6 发病率>25，≤35 7 发病率>35，≤50 8 发病率>50，≤75 9 发病率>75,≤100 6 抗病性评价 6.1 鉴定有效性判别 当设置的感病对照材料达到高感病情级别（8级～9级）时，该批次抗甘蔗黑穗病鉴定视为有效。 6.2 抗病性评价标准 根据供试材料3次重复的发病程度（病情级别）确定其对甘蔗黑穗病的抗性水平，划分标准参见 附录 A。 7 鉴定记载 7.1 甘蔗抗黑穗病鉴定调查记录表参见附录B中的B.1。 7.2 甘蔗抗黑穗病鉴定的结果参见B.2。 3 GB/T35874—2018 附录A （资料性附录） 甘蔗对黑穗病的评价标准 甘蔗对黑穗病的抗性水平，划分标准参见表A.1。 表 A.1 甘蔗对黑穗病的抗性水平划分评价标准 病情级别 抗病性 1 高抗highlyresistance(HR) 2.3 抗病resistance(R) 4 中抗moderatelyresistance(MR) 5 中感moderatelysusceptibility(MS) 6.7 感病susceptibility(S) 8.9 高感highlysusceptibility(HS) SAC SAC 4 GB/T35874—2018 附录B （资料性附录） 鉴定记载表 B.1 甘蔗抗黑穗病鉴定调查记录表 甘蔗抗黑穗病鉴定调查记录表参见表B.1。 表 B.1 甘蔗抗黑穗病鉴定调查记录表 日期： 日期： .. 材料 重复 调查发 调查 累计发 调查发 调查 累计发 编号 调查人 调查人 病株数 总株数 病株树 病株数 总株数 病株树 重复 1 重复 2 重复3 B.2鉴定结果表 甘蔗抗黑穗病鉴定的结果参见表B.2。 5